Identificação e caracterização de novas triptofilinas com propriedades antioxidantes e neuroprotetoras

Abstract

A pele dos anfíbios é uma fonte rica de moléculas bioativas, incluindo as triptofilinas, uma classe heterogênea de peptídeos inicialmente identificados nas secreções dérmicas desses animais. O uso das triptofilinas, também conhecidas como derivados do triptofano, são promissores na medicina para prevenir e tratar doenças causadas ou agravadas por processos de oxidação. Neste estudo, relatamos a caracterização estrutural e as propriedades antioxidantes de dois peptídeos da classe triptofilina: FPPEWISR (PcT1) e FPWLLS-NH₂ (PpT-2), isolados da rã-anã-central Physalaemus centralis e da rã verde ibérica Pelophylax perezi, respectivamente. Os peptídeos foram identificados por meio de clonagem de cDNA e análise comparativa de sequências, além de serem isolados a partir da secreção cutânea dos anfíbios por RP-HPLC. A estrutura primária de PpT-2 foi confirmada por degradação de Edman, enquanto PcT-1 representa uma nova sequência dentro da classe das triptofilinas. A síntese química em fase sólida permitiu a avaliação de suas propriedades bioquímicas e bioativas. Ambos os peptídeos demonstraram atividade antioxidante nos ensaios de eliminação do radical ABTS (0,305 e 0,269 mg equivalentes de Trolox/mg para PcT-1 e PpT-2, respectivamente) e no teste ORAC (0,319 e 0,248 mg equivalentes de Trolox/mg). Além disso, protegeram hemácias humanas contra hemólise induzida por AAPH e restauraram parcialmente o vasorrelaxamento em preparações de aorta de rato após estresse oxidativo induzido por ácido pirogálico, com PpT-2 apresentando um efeito protetor mais pronunciado. A bioatividade de PpT-2 foi ainda investigada em células microgliais BV-2 submetidas a estresse oxidativo induzido por PMA, onde o peptídeo suprimiu a geração de espécies reativas de oxigênio. Também foi avaliada sua ação sobre células de câncer de próstata e bactérias, demonstrando efeito antiproliferativo moderado, mas atividade antimicrobiana negligenciável. Ensaios de toxicidade in vitro e in vivo indicaram alta biocompatibilidade para ambos os peptídeos, sem toxicidade detectável em hemácias humanas ou em larvas de Galleria mellonella tratadas com até 40 mg/kg de PpT-2. Os resultados destacam PcT1 e PpT-2 como candidatos promissores para aplicações terapêuticas e biotecnológicas, especialmente no combate ao estresse oxidativo e em potenciais estratégias de prevenção ou tratamento para distúrbios neurodegenerativos. Em geral, as triptofilinas ou seus derivados são promissores para tratar condições que envolvem desregulação dos neurotransmissores relacionados ao triptofano, mas o uso clínico precisa de mais pesquisas para comprovar sua eficácia e segurança em vários tratamentos.