O reparo de DNA e a virulência fúngica : estudo dos genes APN1, APN2 e XPC de Cryptococcus neoformans

Abstract

Microrganismos patogênicos são expostos a uma série de estímulos que podem danificar o DNA durante a interação com o sistema imunológico do hospedeiro. A sobrevivência microbiana nesta situação depende de um equilíbrio delicado entre a manutenção da integridade do DNA e a adaptabilidade fornecida pelas mutações. Neste estudo, investigamos a associação da resposta de reparo do DNA com a virulência de Cryptococcus neoformans, um basidiomiceto que causa meningoencefalite com risco de vida em indivíduos imunocomprometidos. Nos concentramos na caracterização dos genes putativos de C. neoformans APN1 e APN2, com o objetivo de avaliar um possível papel das endonucleases apurínicas / apirimidínicas (AP) 1 e 2 preditas da via de reparo por excisão de base (BER) na resposta de C. neoformans a condições de estresse e virulência. Nossos resultados demonstraram o envolvimento das endonucleases AP Apn1 e Apn2 na resposta celular ao dano ao DNA induzido por alcilação e radiação UV, na produção de melanina, na tolerância a drogas e na virulência de C. neoformans in vivo. Também apontamos o potencial uso do inibidor de reparo de DNA metoxiamina em combinação com drogas antifúngicas convencionais, para o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas contra esse patógeno fúngico humano. Nós estudamos também o gene XPC/Rad4 de C. neoformans e o impacto que o produto proteico codificado tem na virulência de C. neoformans. Nós demonstramos que XPC está envolvida na morfologia de C. neoformans em resposta ao estresse e a deleção do gene reduz significativamente a produção de fosfolipase pelo fungo. Este trabalho fornece novas informações sobre a resposta ao dano ao DNA do fungo patogênico C. neoformans.