Biocompatibilidade do ácido 5-aminolevulínico nanoveiculado e sua eficácia em mediar a terapia fotodinâmica para tratamento do câncer de mama

Abstract

Ácido 5-aminolevulínico (ALA), pró-fármaco precursor do fotossensibilizante protoporfirina IX (PpIX), é um agente terapêutico fotodinâmico aprovado pelo FDA (Food and Drug Administration, USA). A natureza hidrofílica da molécula, no entanto, limita a sua aplicação a casos de lesões superficiais cutâneas que demandam menor capacidade de penetração de ALA pelas membranas celulares. Uma nova formulação de ALA, baseada em nanocápsulas de poli(ácido láctico-co-glicólico) (PLGA), foi projetada na tentativa de expandir a sua aplicação no campo da oncologia. Neste trabalho, avaliou-se os efeitos biológicos e eficácia do NanoALA em mediar a TFD em modelos experimentais, in vitro e in vivo, de carcinoma mamário murino, bem como a capacidade de permeação e retenção em membrana biológica natural. Para isso, os ensaios foram conduzidos em três etapas/capítulos: (i) ensaio de cinética de incorporação de pró-fármaco em células 4T1, avaliação dos mecanismos anti-tumorigênicos (perfil de morte, função mitocondrial, quantificação da produção de espécies reativas de oxigênio, fragmentação de DNA), testes de fotocitoxicidade (análise morfológica e ensaio MTT), (ii) análise da produção de PpIX em tumor mamário murino, testes de toxicidade aguda, de biocompatibidade e eficácia do tratamento por meio de análises clínicas, hematológicas, bioquímicas, genotóxicas e histopatológicas, (iii) padronização e validação de método analítico para quantificação de ALA, estudo de liberação in vitro, estudos de permeação e retenção em pele de porco. Tomados em conjunto, os resultados indicaram que a nanoformulação favoreceu uma maior captação de pró-fármaco pelas células tumorais em menor intervalo de tempo e mais seletivamente que o ALA livre. Em consequência, os efeitos fototóxicos desencadeados nas mitocôndrias das células tumorais foram mais acentuados e os efeitos adversos foram insignificantes. Foi observada uma redução significativa do crescimento do tumor primário, bem como atenuação do processo metastástico, o que resultou em maior sobrevida dos animais tratados. Além disso, as nanocápsulas de PLGA promoveram maior penetração de ALA para camadas mais profundas da pele. Dessa forma, a TFD mediada por NanoALA emerge como potencial estratégia de tratamento adjuvante/neoadjuvante para o câncer de mama e também como modalidade de tratamento principal para lesões de pele mais profundas, como metástases cutâneas de câncer de mama.