Identificação de espécies de Calonectria e reação de acessos de grão-de-bico a isolados de Calonectria brassicae

Abstract

O grão-de-bico (Cicer arietinum) ocupa atualmente os primeiros lugares entre as pulses (leguminosas com sementes secas comestíveis) mais produzidas e consumidas no mundo. A rica composição nutricional e o elevado valor de mercado são os principais atrativos comerciais do grão-de-bico. No Brasil, a produção é ainda pequena, mas tem aumentado nos últimos anos. A introdução do cultivo dessa leguminosa em novas áreas tropicais pode ser problemática, em especial, devido à presença de doenças causadas por patógenos do solo, incluindo espécies de Calonectria. Esses fungos estão difundidos no país e causam perdas em várias hospedeiras, entre elas, leguminosas. O presente trabalho objetivou caracterizar isolados de espécies de Calonectria oriundos da Região Centro-Oeste do Brasil e avaliar a reação de acessos de grão-de-bico ao patógeno. Os isolados foram obtidos de plantas sintomáticas e, após cultivo em Batata Dextrose Agar (BDA), o DNA total foi extraído das amostras individuais para emprego em análises moleculares. Foram utilizadas as informações de sequência de quatro regiões genômicas: beta-tubulina, calmodulina, fator de elongação 1α e histona. Um grupo de isolados obtidos de grão-de-bico apresentou alta similaridade com isolados de Calonectria brassicae e um segundo grupo com isolados classificados como Ca. orientalis, porém com menores níveis de identidade. A caracterização morfológica e morfométrica das estruturas reprodutivas dos isolados EH-2530, EH-2533 e EH-2536 (obtidos de distintas regiões geográficas) indicou que todos representam isolados da espécie Ca. brassicae. Foram conduzidos ensaios de patogenicidade dos isolados em sete acessos de grão-de-bico em casa de vegetação. Para avaliação da patogenicidade e agressividade dos isolados foi empregada uma escala de notas dos sintomas. Foram empregados os isolados EH-2530 e EH-2533 (ambos classificados como Ca. brassicae) e EH- 2536 (Ca. orientalis). O experimento foi conduzido em um delineamento inteiramente casualizado (DIC), num arranjo em parcelas sub-sub-divididas com três repetições, sendo avaliados os sintomas nas plantas (duas plantas/vaso) entre 10 e 25 dias da inoculação. ‘Cícero, ‘Desi 1606’, ‘Jamu-96’ e ‘Flip 03-109C’ apresentaram sintomas mais severos de murcha e podridões radicular e do colo, enquanto ‘BRS Aleppo’, ‘BRS Toro’ e ‘BRS Cristalino’ foram os acessos menos sintomáticos. Os isolados de Ca. brassicae se mostraram mais agressivos do que o isolado de Ca. orientalis. Em um outro ensaio em DIC, a reação de 38 acessos de grão-de-bico para os isolados de Ca. brassicae foi avaliada entre 7 e 20 dias após a inoculação, num arranjo em parcelas sub-divididas com cinco repetições. Dezenove acessos incluindo ‘Jamu-96’, ‘Desi 1606’, ‘Desi 1605’, Flip 03-109C’, BRS Toro e BRS Cristalino’ apresentaram os sintomas mais severos da doença, enquanto os outros dezenove acessos, incluindo ‘BRS Aleppo’, ‘Cícero’ e demais acessos ‘Gnp’ derivados de‘Cícero’ foram os menos afetados, sugerindo segregação natural dentro da cultivar. Neste contexto, o conjunto de informações gerado no presente trabalho pode auxiliar os programas de melhoramento genético do grão-de-bico para resistência a espécies de Calonectria e fornece importante subsídios para o estabelecimento de sistemas de manejo adequados e sustentáveis desse grupo de patógenos.