Produção dos anticorpos recombinantes anti-TNF e anti-CD3 na bactéria Zymomonas mobilis para o tratamento de colite experimental em camundongos

Abstract

A colite ulcerativa e a doença de Crohn fazem parte do grupo de doenças inflamatórias intestinais, caracterizadas pela inflamação do trato gastrointestinal (TGI). Ainda não há cura para essas doenças e os tratamentos disponíveis visam a diminuição dos sintomas e contenção do avanço das doenças. Uma das abordagens clínicas eficientes é o uso de inibidores de TNF como o anticorpo recombinante Infliximab (Remicade®). No entanto, a imunoterapia com anticorpos monoclonais ainda apresenta alto custo e toxicidade intrínseca, sugerindo a necessidade de alternativas menos tóxicas e mais acessíveis. Esse trabalho investigou a utilização da bactéria gram-negativa Zymomonas mobilis como veículo potencial para expressão dos anticorpos recombinantes anti-TNF e anti-CD3 no TGI de camundongos para reduzir os efeitos da colite ulcerativa induzida por DSS. Para isso, foram construídos três vetores de expressão de Z. mobilis contendo os genes que codificam para as regiões variáveis do mAb infliximab no formato de cadeia única (scFv), e do anticorpo murino anti-CD3 145-2c11, nos formatos scFv e FvFc. Com o tratamento realizado foi possível observar que a administração de Z. mobilis contendo ou não os plasmídeos de interesse foi efetiva na diminuição da inflamação, indicada pela estabilidade na perda de peso, no índice de atividade da doença e na melhora dos índices histopatológicos. Somado a isso, o tratamento com Z. mobilis restaurou a barreira mucosa além de aumentar a expressão dos genes Muc3 e Ocln e potencializar um fenótipo regulador, induzindo genes imunomoduladores como Tgfb, Il5, Il10 e Foxp3 e reduzindo a expressão relativa de mRNA das citocinas pró-inflamatórias Tnf, Il6 e Il17. A análise do microbioma sugere que a Z. mobilis pode alterar a microbiota intestinal, aumentando a abundância de bactérias como a Akkermansia muciniphila e diminuindo Escherichia coli. Por fim, os dados sugerem que Z. mobilis pode aliviar a progressão da doença e ser considerado um possível adjuvante probiótico para o tratamento das doenças inflamatórias intestinais.