Uso do extrato de levedura (YE) como alternativa ao soro fetal bovino (SFB) no cultivo in vitro de embriões bovinos

Abstract

A bovinocultura é uma das atividades de maior destaque no agronegócio do Brasil. Em 2020, o país liderou a exportador de carne bovina do mundo. Essa realidade só foi alcançada pela multiplicação do número de descendentes de animais de maior valor genético, proporcionado pelo uso intensivo das biotecnologias na área da reprodução animal. No que se refere as biotecnologias, o Brasil tornou-se uma referência na produção in vitro de embriões bovinos (PIVE). Ainda que a PIVE na espécie bovina seja uma técnica estabelecida e já utilizada comercialmente, diversos esforços são realizados para melhorar seus indicadores quantitativos e qualitativos. Umas das alternativas que tem sido investigada, é o aperfeiçoamento dos meios de cultivo, seja pelo ajuste das propriedades físico-químicas, pela adição de agentes com potencial antioxidantes ou pela suplementação com nutrientes ou fontes de fatores embriotróficos. A suplementação com SFB possui efeitos benéficos no desenvolvimento embrionário in vitro, porém sua composição é indefinida e pode variar entre os lotes. O uso do SFB tem sido associado a alterações metabólicas nos embriões, com potencial impacto nos resultados da criopreservação. Além disso, como é um produto de origem animal, há um risco intrínseco de veiculação de patógenos, e existem questões éticas relacionadas ao seu processo de fabricação. Desse modo, torna-se necessário buscar alternativas ao uso do SFB nos sistemas de cultivo. O presente trabalho traz uma revisão sobre a suplementação proteica durante o cultivo in vitro de embriões, e apresenta os resultados experimentais do uso do Extrato de Levedura (Yeast Extract – YE), como uma nova fonte proteica alternativa para substituir o SFB durante o CIV. O YE é conhecido por melhorar sistemas de cultivos celulares de outros de mamíferos, pois em sua composição há presença de componentes importantes para o metabolismo celular, além de apresentar maior padronização dos lotes e risco sanitário reduzido, quando comparado ao SFB. Para avaliar seu uso no cultivo in vitro de embriões, foram avaliadas diferentes estratégias de substituição do SFB. Complexos cumulus-oócito (CCO) imaturos de grau I obtidos em abatedouro de ovários de fêmeas da raça Nelore foram maturados in vitro (MIV) e fertilizados in vitro (FIV) e os presumíveis zigotos (n=5.875) foram distribuídos aleatoriamente em cinco grupos, submetidos ao cultivo in vitro (CIV) em meio SOF acrescido de BSA (3mg/mL) e suplementados com: G1, 3% SFB (controle positivo); G2, sem suplemento (controle negativo); G3, YE 1% durante todo o CIV; G4, YE 1% até dia 3 e 3% SFB dos dias 3 a 9 de CIV; G5, YE 1% somente até o dia 3 de CIV. Os resultados obtidos demonstram que, o uso do YE 1% (0,1mg/mL), como suplemento, não compromete o desenvolvimento embrionário ou as taxas de gestação pós-transferência à fresco, associado a BSA (3mg/mL) em sistemas sequenciais e com baixa tensão de oxigênio (5,5%), porém o YE causa maior acúmulo de lipídios no citoplasma e reduz a criotolerância. Portanto, conclui-se que YE 1% é uma alternativa para a substituição do SFB durante o CIV, porém não atenua o acúmulo de lipídeos e seus efeitos negativos na criopreservação dos embriões.