Avaliação do efeito anti-inflamatório de nanoemulsão à base de óleo de pequi (Caryocar brasiliense) em macrófagos in vitro e em modelo de edema in vivo

Abstract

A inflamação é um conjunto de alterações que ocorrem no organismo e se inicia imediatamente após um estímulo, estando associada a diversas causas, que vão desde infecções à estresse ou disfunção relacionados a fatores emocionais, imunológicos ou genéticos. A inflamação crônica é uma consequência da persistência de diversas doenças, tendo relação com a obesidade, diabetes e câncer, que são hoje as principais causas de mortalidade no mundo, fenômeno que tem contribuído para um aumento expressivo da demanda médica para casos inflamatórios. Apesar de serem amplamente estudados ao longo destes anos, ainda há a necessidade de novos fármacos com efetiva ação antiinflamatória e que tragam segurança para uso a longo prazo. Neste quesito, a biodiversidade brasileira representa fonte rica de moléculas bioativas que podem contribuir tanto para a resolução quanto para a prevenção de processos inflamatórios. O óleo de pequi (Caryocar brasiliense), planta originária do Cerrado brasileiro, é constituído principalmente por ácidos graxos e carotenoides que lhe conferem diversas propriedades biológicas, incluindo efeito anti-inflamatório. Entretanto, a hidrofobicidade dessas moléculas representa limitações à suas administrações. Tais limitações podem ser superadas por meio da nanoestruturação dos componentes do óleo afim de otimizar sua biodisponibilidade. Diante do exposto, o objetivo geral do presente trabalho foi de formular e caracterizar nanoemulsões a bas de óleo de pequi (PeNE) e investigar seus efeitos anti-inflamatórios em células de macrófagos, in vitro e seus efeitos antiinflamatórios e antinociceptivos em modelo de edema, in vivo. Inicialmente, uma revisão sistemática sobre os efeitos anti-inflamatórios do óleo de pequi. Foram selecionados 10 artigos que avaliaram o efeito do óleo de pequi em diferentes modelos de inflamação e tiveram como principais conclusões que o óleo de pequi apresenta atividade ateroprotetora, anti-inflamatória, redução de edema, anti-nociceptivo, redução de citocinas pró-inflamatórias e redução de lesão hepática; redução da pressão arterial e colesterol total. O próximo passo constitiu na avaliação do efeito do óleo de pequi livre e nanoestruturado (PeNE) em células de macrófagos, in vitro. Para tanto, foram utilizadas PeNE com diâmetro hidrodinâmico de 124 nm, PDI 0,24 e Potencial Zeta -15,00 mV, com citotoxidade dose dependente sobre macrófagos em 24 horas, em concentrações iguais ou maiores que 360 µg/mL (p<0,05). Além disso, não alterou a morfologia dos macrófagos, porém, induziu a produção da IL-10 em 100% em relação ao controle, sem diferença significativa em relação ao óleo livre, porém, inibiu IL-12 em 89,32%, sendo significativamente superior em relação ao óleo livre, 82,33% (p<0,05) sugerindo-se atividade anti-inflamatória em modelo in vitro. Para os ensaios in vivo, obteve-se diâmetro hidrodinâmico da PeNE concentrada na faixa de 230 nm, PDI 0,239 e Potencial Zeta próximo a -15 mV, com morfologia esférica. A suplementação com a nanoemulsão ou óleo livre foram realizados ao longo de 15 dias consecutivos, por gavagem, em dose única diária de 100 ou 400mg/kg. Observou-se ausência de atividade anti-inflamatória, sem redução significativa de edema após indução com carragenina, porém, a PeNE (100 ou 400 mg/kg) reduziu a hipernocicepção em 27 e 40%, respectivamente (p < 0.05) e o óleo livre reduziu em 40 e 52%, respectivamente (p < 0.05). Além disso, ambos tratamentos não mostraram toxicidade quando analisados os dados bioquímicos e histológicos. Não se observou alterações clínicas, disfunções motoras, alterações de peso e comportamental dos animais, sugerindo-se biocompatibilidade do óleo de pequi e do PeNE. Desta forma, a utilização do óleo de pequi nanoestruturado como alternativa ou complemento aos fármacos anti-inflamatórias convencionais é promissora e carece de atenção para futuros estudos investigativos para melhor compreensão do seu potencial ant-inflamatório e antinociceptivo.