Caracterização de Archaea halófilas presentes em sais alimentares

Abstract

Organismos halófilos crescem em ambientes com altas concentrações de sais e são distribuídos nos três domínios da vida: Bacteria, Eukarya e Archaea. Tais ambientes incluem águas salgadas, solos, alimentos salgados fermentados e sais alimentares. A presença de arqueias halófilas em sais alimentares é comum e tem sido descrita em diversos trabalhos científicos, entretanto, não há informações sobre sua ocorrência em sais comercializados no Brasil. Assim, este trabalho teve como objetivo principal a caracterização de arqueias halófilas extremas presentes em sais alimentares, por meio de abordagens dependentes da cultura. Alíquotas de quatro sais comerciais foram inoculadas em dois meios de cultura para halófilos (ATCC e MGM), com a adição de NaCl 3 ou 4 M, em busca de organismos halófilos extremos. Os resultados obtidos sugerem a presença procariotos nos sais analisados, uma vez que o crescimento microbiano foi observado em todos os meios analisados. A maioria das colônias obtidas apresentou coloração avermelhada, típico de Archaea halófilas, enquanto a análise microscópica revelou a presença cocos e bacilos, predominantemente Gram negativos. Todas as culturas foram submetidas à extração de DNA, seguido de PCR, com primers específicos para os domínios Archaea e Bacteria, a fim de verificar que tipos de procariotos se encontravam presentes nos sais analisados. Os amplicons obtidos de alguns dos sais foram então ligados em vetores de clonagem e transformados em Escherichia coli XL1-Blue. Os clones recombinantes foram analisados por sequenciamento de DNA e os resultados revelam a presença de Archaea cujos genes 16S rRNA exibem alto grau de identidade com os respectivos genes dos gêneros Halobacterium e Halolamina.