Fotohipertermia como possível indutora de infertilidade em ratos wistar machos

Abstract

Este estudo teve como objetivo investigar a efetividade da fotohipertermia (FHT) em testículos de ratos Wistar como indutor de infertilidade. Foram utilizados 25 ratos Wistar (16 semanas de idade). O tratamento FHT consistiu na injeção intratesticular de fluido magnético combinado com a irradiação por LED apenas nos testículos até atingir a temperatura 45 ºC. Vinte oito testículos foram submetidos ao tratamento de FHT (grupo FHT). Oito testículos receberam apenas a injeção intratesticular do fluido magnético (Grupo NPM), e 14 testículos foram submetidos apenas a irradiação do LED. Os animais dos grupos NPM e LED foram eutanasiados 7 dias após o tratamento. Os animais do grupo tratamento FHT foram eutanasiados 7, 28 e 56 dias após o tratamento. Foram feitas ultrassonografias dos testículos semanalmente até o dia da eutanásia. Após a eutanásia os órgãos foram fixados para histologia, a cauda dos epidídimos foi macerada para avaliações espermáticas. Os testículos foram fixados para análise histomorfológica. A ultrassonografia dos testículos e epidídimos mostrou um aspecto geral com parênquima homogêneo, textura lisa e limites bem definidos. O volume testicular médio diminuiu significativamente da primeira semana (4,48 cm3) para a 2ª semana (3,70 cm3), e novamente da 4ª (3,63 cm3) para a 5ª semana (1,92 cm3). Em 17,5% dos casos apresentou uma região hiperecóica extensa adjacente aos testículos sugerindo processo inflamatório dos epidídimos, confirmado durante a eutanásia. A motilidade espermática mostrou uma diminuição significativa (p<0,05) nos grupos tratados FHT28 e FHT56 (27,6% 24,2% respectivamente) quando comparados aos grupos FHT7 (91,5%), grupo LED (100%) e grupo NPM (100%). Houve uma diminuição significativa (p<0,05) na porcentagem de espermatozoides normais no grupo FHT7 (1%) em comparação ao grupo tratamento FHT56 (38%) e aos grupos controles NPM (67%) e LED (57%) e um aumento significativo (p<0,05) no número de patologias de cabeça no grupo tratado FHT7 (32%) em comparação com o grupo LED (15%) e aumento significativo (p<0,05) no número de patologias de cauda no grupo tratamento FHT7 (68%) comparado aos grupos controles NPM (17%) e LED (28%). O número de espermatozoides na cauda do epidídimo não mostrou diferença estatística entre os grupos tratados e controle, apesar dos valores numéricos serem bem diferentes. Os parâmetros sanguíneos de hemograma e bioquímicos estavam dentro dos limites de normalidade para a espécie, ainda que vistas algumas alterações foram observadas, sem correlação com o tratamento. A histologia permitiu observar que o grupo LED apresentou estrutura dos túbulos seminíferos intacta com a presença de todas as células da linhagem germinativa. O grupo NPM apresentou alguns danos teciduais, com infiltrado dentro dos túbulos seminíferos provavelmente devido a algum efeito tóxico da nanopartícula. O grupo FHT7 apresentou túbulos com células danificadas, em alguns casos inchadas, sendo permitido identificar apenas células de Sertoli e espermatogônias e com nanopartículas visíveis no espaço intersticial. O grupo FHT28 apresentou túbulos seminíferos preenchidos com células desorganizadas com a maior parte dos túbulos vazios, mas na região da periferia do testículo alguns túbulos estavam preservados. No grupo FHT56 os danos estavam presentes nos túbulos seminíferos e no interstício, com vacúolos no epitélio tubular, com nanopartículas mais agregadas e melhor distribuída no tecido. Rim, fígado, baço e pulmão apresentaram característica microanatômicas íntegras. O uso da fotohipertermia associada a injeção intratesticular do fluído magnético afim de induzir infertilidade em ratos Witstar machos mostrou ser eficiente no curto prazo (56 dias), sem efeitos colaterais graves. No entanto, o efeito não foi completo, provavelmente por não ter havido homogeneidade da distribuição das nanopartículas em todo o testículo. Mais estudos são necessários no sentido de aperfeiçoar o método e obter um efeito de esterilização completo.