Caracterização eletrofisiológica de uma K-KTx obtida da peçonha doescorpião Opisthacanthus cayaporum, OcyC9, e de seu análogo OcyC9 MOD

Abstract

Vários peptídeos de escorpiões classificados na família das toxinas de escorpião kappa-KTx são considerados como bloqueadores fracos no canal de potássio. A maioria desses peptídeos tem atividade nos Kv a concentrações na ordem de μM; portanto, é possível que o alvo molecular desses peptídeos não tenha sido encontrado ainda. Nesse trabalho, é apresentado o isolamento, identificação e caracterização eletrofisiológica do peptídeo OcyC9 (Kappa-KTx 2.6) da peçonha do escorpião Opisthacanthus cayaporum de quem a sequência do precursor foi previamente descrita pelo nosso grupo (UNIPROTKB-KW C5J893). Devido à alta similaridade do peptídeo OcyC9 com a toxina OmTx2 isolada do escorpião Opisthacanthus madagascariensis, estimou-se que o peptídeo de estudo poderia induzir os mesmos efeitos biológicos que a OmTx2. OcyC9 foi purificado por HPLC e a massa molecular monoisotópica experimental de [M + H] +: 2545,03 Da e não apresenta modificação pós-traducional. O desenho e síntese comercial do peptídeo análogo (OcyC9 modificado) foram realizados, além da síntese do peptídeo OcyC9 (natural) em decorrência da baixa disponibilidade do peptídeo nativo. Para a caracterização eletrofisiológica, OcyC9, OcyC9MOD e OmTx2 foram quimicamente sintetizados e a atividade eletrofisiológica foi avaliada. OcyC9 demonstrou ser um bloqueador da corrente de K+ (58,5%) a 500 μM e OcyC9MOD (48,18%) a 250 μM no canal Kv1.3. Posteriormente, foram testados outros alvos moleculares como os canais Kv2.1, BK (KCa1.1), KATP (KIR6.2 / SUR 1) e canais de cálcio nesse trabalho.