Papel da melanina de Cryptococcus neoformans na fagocitose por macrófagos murinos J774

Abstract

O fungo Cryptococcus neoformans é o principal agente etiológico da criptococose, afetando principalmente indivíduos imunocomprometidos. A doença tem o pulmão como sítio primário, apresentando tropismo pelo Sistema Nervoso Central onde sua principal manifestação clínica é a meningoencefalite. É um importante problema de saúde pública, que tem seu diagnóstico de forma tardia e os dados epidemiológicos subestimados. A cápsula, a melanina e a lacase são fatores de virulência marcantes, sendo um campo promissor para entendimento da patogênese e promoção de alvos terapêuticos mais adequados. A melanina de C. neoformans exerce um impacto na proteção contra a resposta imune efetora e também dificultando a ação de antifúngicos. Nosso grupo estudou os efeitos da melanina de C. neoformans na interação com macrófagos murinos por meio de ensaios de fagocitose e também detecção de Fagocitose associada a LC3 (LAP), com duas cepas fúngicas: o selvagem H99 e o mutante para lacase LAC1. Observamos que sem suplementação para melanização o selvagem era mais fagocitado que o mutante, demonstrando efeitos da ausência de lacase. A adição de suplementação para melanização diminuiu a ocorrência de fagocitose para o selvagem ao longo do tempo e para o mutante apenas após 48 horas, manifestando efeitos da L-DOPA mesmo no mutante. Quanto a detecção de LAP, o mutante apontou maior ocorrência que o selvagem na ausência de melanina, sugerindo que a lacase seja importante para a evasão do fungo. Quando suplementamos para produção de melanina, não houveram alterações significativas quanto a detecção e quantificação da LAP para o selvagem, com um ligeiro aumento observado no mutante após 48 horas. Esses resultados em conjunto sugerem que a melanina seja protetora quanto a ação efetora de macrófagos, mas que outros interferentes, como a lacase, podem ser tão relevantes quanto.