Efeitos da curcumina na expressão de micrornas em células de câncer de pâncreas, mama e osteossarcoma

Abstract

O câncer de pâncreas é uma das malignidades mais letais no mundo. Sua taxa de sobrevida de 5 anos é de cerca de 9%. A dificuldade de diagnóstico precoce, alta resistência à quimioterapia, falta de terapia alvo contribuem para sua letalidade. MicroRNAs são pequenos RNAs não codificantes que regulam negativamente a expressão de genes. O miRNA-145-5p se encontra com baixa expressão em diversos tipos de câncer, e tem se destacado como supressor tumoral uma vez que possui com alvos genes envolvidos em vias de sinalização celular relacionadas à pluripotência, proliferação, invasão e migração celular. O miRNA-1246 por sua vez vem sendo mais recentemente estudado, e se encontra hiperexpresso em diversos tipos de câncer, e tem se atribuído papel de oncomiR, estando relacionado à manutenção da proliferação celular, pluripotência e resistência a terapias. A curcumina é um fitoquímico muito utilizado como tempero na culinária asiática. Diversos estudos vêm mostrando seu potencial com agente antioxidante e antitumoral. Entretanto pouco se sabe sobre o papel da curcumina na modulação da expressão de miRNAs em geral e do miRNA-1246 em especial, ou deste próprio, no câncer de pâncreas. O presente trabalho teve como objetivo investigar, in vitro, se o tratamento com curcumina altera o nível de expressão dos miRNAs miR-145-5p e miR-1246, bem como seus alvos, no câncer de pâncreas humano. Estratégias de bioinformática foram utilizadas para se compreender o papel biológico dos miRNAs, seu significado clínico, bem como de seus alvos. A linhagem celular PANC-1 foi tratada com curcumina e viabilidade celular foi avaliada pelo método colorimétrico de MTT. A expressão dos miRNAs miRNA-145-5p e miRNA-1246 foi medida por meio de RT-qPCR após tratamento com curcumina por 06h, 24h e 48h. A expressão dos genes alvos do miRNA-145-5p, e relacionados à pluripotência, OCT4, SOX2, KLF4 e c-MYC foi avaliada por meio de RT-qPCR após tratamento com curcumina por 06h, 24h e 48h. A expressão do gene alvo do miRNA-1246, CCNG2 e o gene predito CRADD foi avaliada por meio de RT-qPCR após tratamento com curcumina a 15 μM por 06h, 24h e 48h. O tratamento com curcumina reduziu a viabilidade de maneira estatisticamente significativa em quase todas as concentrações utilizadas. O tratamento com curcumina alterou de forma significativa a expressão de miR-145-5p em 06h após o tratamento com curcumina; de miR-1246 e OCT4 em 06h e 48h após tratamento; e de CCNG2 em 24h e 48h após tratamento. Esses resultados sugerem a existência de uma via de pluripotência, que pode ser ativada por compostos citotóxicos, com a curcumina, e que pode levar à resistência à quimioterapia e agressividade do tumor.