Análise citológica a partir de biópsia líquida de câncer de mama

Abstract

O câncer de mama é o segundo mais incidente no mundo e é o que tem maior número bruto de novos casos em mulheres. No monitoramento do tratamento ou de possíveis recidivas, a biópsia líquida representa uma alternativa simples e menos invasiva às biópsias de tecido. A biópsia líquida permite detectar células cancerosas que entram na corrente sanguínea conhecidas como Células Tumorais Circulantes (CTCs), que exibem alterações moleculares dinâmicas e possuem informações úteis sobre a composição tumoral, capacidade de invasão, suscetibilidade a medicamentos e resistência à terapia. Nos últimos anos, tem havido grande interesse em tecnologias inovadoras, sensíveis e eficientes para detectar e caracterizar CTCs. Objetivo. O objetivo desse estudo foi avaliar a aplicabilidade da citologia e imunocitoquímica para identificação de células de câncer de mama de linhagem e de pacientes em amostras de sangue periférico preparadas por duas técnicas citológicas. Métodos. Amostras de sangue de doadores saudáveis enriquecidas com diferentes diluições de células da linhagem humana de câncer de mama MCF-7 e amostras de sangue de pacientes com câncer de mama foram preparadas pelas técnicas de citocentrifugação e cell-block e submetidas a Imunocitoquímica, utilizando os marcadores PanCK, EpCAM e GATA-3. Resultados. A taxa de recuperação de células MCF-7 variou de 0 a 66% para a citocentrifugação e de 0 a 73,56% para o cell-block. As taxas de recuperação foram maiores na maior concentração utilizada (1.000 células/mL) tanto para a citocentrifugação quando para o cell-block, sendo as médias das taxas de recuperação 58,05% e 58,19%, respectivamente. Quanto às características clínicas das pacientes com câncer de mama, a idade média foi de 53 anos. O carcinoma invasivo, o tipo histológico ductal, o grau II e o estágio T2 estavam presentes em 79,73%, 79,66%, 40,68% e 44,07% das pacientes, respectivamente. Invasão vascular foi encontrada em apenas 11 (18,64%) dos espécimes cirúrgicos. As metástases linfonodal e à distância foram observadas em 57,62% e 6,78% das pacientes. Das pacientes, 25,42% estavam iniciando sua primeira linha de terapia. Não foi possível gerar dados de quantificação de CTCs nas amostras de biópsia líquida de pacientes, sendo encontradas células suspeitas para câncer de mama em apenas uma amostra. Conclusão. Através citologia e imunocitoquímica de amostras de sangue periférico preparadas por citocentrifugação e cell-block obteve-se resultados satisfatórios para a recuperação de células de linhagem de câncer de mama, independentemente da técnica de preparo utilizada. A citocentrifugação e o cell-block, apesar de suas limitações, demonstraram serem técnicas potencialmente viáveis para sua aplicação na avaliação do sangue de pacientes com câncer metastático.