Avaliação da ocorrência de exocitose não-lítica em isolados clínicos de Cryptococcus spp

Abstract

A criptococose é uma micose sistêmica adquirida por inalação de propágulos de fungos do Cryptococcus neoformans (Cn) e C. gattii. Cn genotipo VNI é cosmopolita, e causa doença oportunista em indivíduos imunocomprometidos, sendo importante causa de meningoencefalites e morte em indivíduos com AIDS. Esta micose apresenta altos índices de letalidade mesmo na presença de terapia. Isso pode ser explicado pelo diagnostico tardio, pela gravidade da infecção quando atinge o sistema nervoso central, principalmente na forma de meningoencefalite, e as dificuldades do tratamento. Em 2014 foram registrados 223.100 casos de criptococose, com 181.100 mortes. A África sub-saariana registrou 73% dos casos de criptococose. Na América Latina como um todo se estima 5.300 casos e 2.400 mortes por ano. O descaso observado pela dificuldade de aquisição de fármacos antifúngicos, a não-disponibilização de teste rápidos já existentes no mercado para diagnostico da criptococose, A ausência de notificação obrigatória, mostram como a criptococose é negligenciada a nível da saúde pública. Vários fatores de virulência desses agentes já foram descritos e caracterizados, como a produção da complexa cápsula polissacarídeos, de melanina, e a capacidade de crescer no interior de macrófagos. Além desses, há também fatores relacionados ao hospedeiro que serão importantes em determinarse o resultado dessa interação, como a capacidade dos macrófagos de fagocitar ou eliminar o Cryptococcus spp. A relação fungo-hospedeiro é dinâmica e determina a sobrevivência do fungo, a contenção da infecção, a disseminação fúngica, os diferentes estágios de progressão da doença e a sua gravidade. A exocitose não-lítica é um mecanismo em que um microrganismo previamente fagocitando pode sair do interior do macrófago sem que haja ruptura da célula hospedeira, em um processo em que ambas células continuam vivas. Ainda não é totalmente claro se os benefícios desse processo são maiores para o hospedeiro ou para o patógeno. Nesse trabalho avaliamos por videomicroscopia o processo de exocitose não-lítica após a interação de macrófagos com oito isolados clínicos de Cn e duas linhagens controle. Observamos diferentes percentuais de exocitose não-lítica entre as diferentes linhagens clínicas e que esse processo acontece continuadamente durante as 24h de interação macrófago-fungo. Com a finalidade de avaliarmos a possível relação entre a expressão desses fatores de virulência por essas linhagens e a exocitose não-lítica correlacionamos esses resultados com a expressão de fatores de virulência in vitro por esses isolados, tais como a produção de melanina, o tamanho da cápsula, a sobrevivência do fungo após a interação com macrófagos murinos e o crescimento fúngico. Identificamos uma possível correlação entre a exocitose não-lítica e a produção de melanina pelo fungo e também com a capacidade do fungo em sobreviver a interação com macrófagos. Não observamos uma correlação entre o tamanho da capsula em meio Sabouraud e a exocitose nãolítica. Pretendemos continuar esse estudo utilizando um número maior de linhagens e futuramente correlacionar esses dados com informações clínicas dos pacientes dos quais tais isolados foram obtidos, a fim de caracterizarmos melhor o perfil de isolados clínicos brasileiros desse fungo.