Efeitos do ácido pantotênico na interação entre Cryptococcus neoformans e macrófagos

Abstract

O fungo Cryptococcus neoformans é um dos agentes etiológicos da criptococose, uma doença sistêmica que afeta principalmente indivíduos imunocomprometidos, e que pode se desenvolver em meningoencefalites graves quando o fungo consegue chegar ao sistema nervoso central (SNC). Nas últimas décadas foi demonstrado que esse fungo, assim como outros, utiliza quorum sensing (QS) para regular diversos fenótipos. QS é um tipo de comunicação microbiana mediada por pequenas moléculas autoindudoras ou moléculas de QS (QSM), que são secretadas por esses organismos e que quando atingem concentrações estimulatórias podem induzir mudanças na expressão de determinados fenótipos em toda população de maneira sincronizada. Nosso grupo demonstrou que o meio condicionado (CM) de C. neoformans produzia efeitos no crescimento planctônico e de biofilmes desse fungo, na secreção do polissacarídeo da cápsula e na produção de melanina. O processo de caracterização da molécula responsável por essas atividades de QS revelou a presença de ácido pantotênico no CM, indicando que essa molécula, ou algum derivado dela, são responsáveis pelas atividades observadas. Visto que as QSM também podem atuar sobre células do hospedeiro, nosso trabalho buscou identificar possíveis atividades do AP na interação de C. neoformans com macrófagos, importantes células efetoras na resposta imune a esse fungo. Para isso, testamos a interação entre a cepa H99 de C. neoformans e macrófagos derivados de medula óssea de camundongos C57BL/6, avaliando a fagocitose, viabilidade fúngica e produção de citocinas na presença do AP e/ou CM. Em experimentos de fagocitose em que os fungos foram incubados com macrófagos na presença de CM ou AP observamos um aumento no percentual de fagocitose em ambas as situações, no entanto esse aumento não foi acompanhado de efeitos no índice fagocítico. Não observamos diferenças na produção de TNF-α, IL-6, IL-10 ou de MCP1 por macrófagos incubados com CM ou AP sem a presença do fungo. A única diferença observada foi uma diminuição na produção de IL-6 por macrófagos incubados com fungos na presença de CM. Em relação à sobrevivência fúngica, o AP produziu uma diminuição no número de unidades formadoras de colônia de leveduras intracelulares quando esteve presente durante o período de fagocitose do fungo, sugerindo uma possível atividade dessa molécula estimulando as atividades microbicidas de macrófagos, uma vez que não observamos efeitos dessa molécula na fagocitose do fungo. Contrariamente, na presença de CM observamos um aumento no número de unidades formadoras de colônia, provavelmente derivado da ação do CM no crescimento de leveduras extracelulares, embora seja necessário investigarmos possíveis efeitos do CM no processo de exocitose não-lítica.