Obtenção de plantas de soja transformadas com o gene Qua-Quine Starch sob regulação do promotor da β-conglicinina

Abstract

O gene órfão Qua-Quine Starch (QQS) é encontrado exclusivamente no genoma da planta modelo Arabidopsis thaliana. A proteína QQS, caracterizada pela sua interação com fatores transcricionais, atua de maneira a acentuar o desvio do fluxo metabólico de carbono e nitrogênio para a produção de proteínas ao invés de açúcares de reserva. Em estudos prévios, plantas de soja, arroz e milho transformadas com o gene QQS sob regulação de promotor constitutivo apresentaram aumento proteico em todos os seus tecidos. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo a obtenção de plantas de soja transformadas com o gene QQS sob a regulação do promotor da β-conglicinina, específico de semente, de maneira a direcionar sua expressão exclusivamente às sementes, como forma de minimizar possíveis desequilíbrios energéticos causados pela introdução deste transgene nos demais tecidos vegetais. O vetor de transformação foi construído pela substituição do gene da Cianovirina (CVN), presente no vetor pβCongCVN, pelo gene QQS. O plasmídeo resultante, pβCongQQS, juntamente com o vetor pAC321, o qual contém o gene de resistência ao agente de seleção imazapyr, foi utilizado na co-transformação de embriões zigóticos de soja, por meio do método biobalístico. Os bombardeamentos realizados resultaram na obtenção de três plantas cuja presença do gene QQS foi confirmada por experimentos de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e Southern Blot. Contudo, as mesmas análises de detecção não confirmaram a presença do transgene na progênie destas plantas transgênicas, fenômeno que pode estar relacionado a uma série de processos moleculares os quais são discutidos nesta dissertação.