Avaliação da maturação de células dendríticas por nanoestruturas de maghemita associadas a azul de metileno para o tratamento de câncer de mama e de ovário in vitro

Abstract

O câncer de mama, segundo tipo mais comum, e o câncer de ovário, o mais letal dentre os tumores do aparelho reprodutor feminino, destacam-se pela alta incidência e letalidade. O desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas, com o auxílio da nanotecnologia, vem ganhando destaque pela liberação controlada e direcionada de fármacos. Paralelamente, o papel do sistema imunológico no tratamento do câncer tem promovido o desenvolvimento de inúmeras pesquisas na área das imunoterapias focando naquelas capazes de promover uma resposta imune eficaz contra os tumores, como aquelas baseadas na ativação e maturação de células dendríticas. Estudos prévios demonstram a eficácia, in vitro, do uso de nanopartículas de maghemita associadas ao azul de metileno (MAGCIT-AM) para o tratamento de câncer de mama e de ovário. Assim, com base nesses achados, o presente trabalho incluiu a aplicação do MAGCIT-AM a fim de promover uma resposta imune antitumoral para o tratamento do câncer de mama e de ovário in vitro. Foram utilizadas duas linhagens celulares de carcinoma de mama humano (MDA-MB-231 e T-47D) e uma linhagem de câncer de ovário (A2780). MAGCITAM apresentou diâmetro hidrodinâmico de 60,93 nm com índice de polidispersão de 0,199 e potencial zeta de -20,9 mV. A endocitose das nanopartículas foi observada após 6 horas de tratamento, com grande acúmulo de nanopartículas internalizadas em estruturas bem delimitadas, semelhantes a lisossomos e/ou endossomos, conforme evidenciado por análise de microscopia eletrônica de transmissão (MET). A análise do mecanismo de morte e das vias oxidativas demonstrou aumento nos níveis de estresse oxidativo e de lipídeos peroxidados, acompanhado do envolvimento de enzimas antioxidantes. Por fim, ensaios de citometria de fluxo revelaram a modulação na biogênese de corpúsculo lipídico em linhagens de câncer de mama, a redução do potencial transmembranar mitocondrial, bem como a maturação das células dendríticas, evidenciada pelo aumento na expressão de marcadores CD86, CD11c, CD25, CD40 e HLA-DR, sugerindo que a morte celular induzida por MAGCIT-AM é capaz de promover a maturação de células dendríticas, reforçando o seu potencial como estratégia terapêutica para câncer de mama e de ovário.