Avaliação do potencial regenerativo in vitro de polpas descelularizadas como Scaffold biológico

Abstract

Terapias regenerativas utilizando arcabouços derivados da matriz extracelular descelularizada (MECd) têm demonstrado grande potencial para promover a regeneração tecidual e restaurar a vitalidade do tecido pulpar. Estudo recente identificou a permanência de proteínas-chave relacionadas ao processo regenerativo endodôntico, como a Periostina (POSTN) e Fibrilina (FBN1) em MECd por proteômica nos dois protocolos utilizados neste trabalho. A partir desses achados, este estudo teve como objetivo avaliar a interação entre os tecidos de polpa dentária descelularizada (DP), obtidos por dois métodos de descelularização, e as células-tronco da polpa dentária (DPSCs). A DP foi testada em duas formas: extratos de polpa descelularizada (DPE) e polpa dentária descelularizada liofilizada (FDP). A eficiência da descelularização foi confirmada por coloração com DAPI e extração de DNA. Dois tipos de produtos de polpa descelularizada foram preparados, resultando nos grupos DPEM, DPES, FDPM e FDPS. Esses grupos foram analisados por espectrometria de massa com desorção/ionização a laser assistida por matriz - tempo de voo (MALDI-ToF). A citotoxicidade foi avaliada pelo ensaio de MTT e a morfologia celular foi analisada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). A proliferação e migração das DPSCs foram avaliadas pelo teste de exclusão do azul de tripano e pelo ensaio de arranhadura (scratch assay), respectivamente. As análises estatísticas foram realizadas por meio dos testes ANOVA e Tukey, considerando-se nível de significância de p<0,05. A análise MALDI-ToF revelou diferenças significativas nos perfis proteicos entre os grupos. Embora o grupo DPEM tenha mostrado citotoxicidade inicial, com redução da viabilidade celular após 24 horas, uma recuperação significativa foi observada após 48 horas, sugerindo um efeito citotóxico transitório. A análise de MEV mostrou rupturas celulares nos grupos DPEM e DPES a 72 horas, indicando uma resposta celular inicial, mas ensaios subsequentes demonstraram recuperação celular. Todos os grupos exibiram altas taxas de migração e proliferação, com destaque para os grupos FDPM e FDPS, que apresentaram melhores resultados. Estes resultados demonstraram a alta eficácia dos produtos derivados da polpa dentária descelularizada, destacando seu papel crucial na regeneração pulpar. Embora todos os grupos tenham mostrado resultados favoráveis, os produtos de polpa dentária liofilizada (FDPS e FDPM) se destacaram com resultados superiores, exibindo melhor desempenho em comparação com o extrato de polpa dentária liofilizada. Ambos os produtos de polpa descelularizada demonstraram forte potencial para regeneração tecidual, apesar das variações observadas. Novas pesquisas são necessárias para esclarecer os mecanismos subjacentes e as vias de sinalização envolvidas.