Análise de toxicidade e dermatocinética do ibrutinib em modelos de pele humana

Abstract

O ibrutinibe (IBR) é um inibidor da tirosina quinase sob investigação em ambientes pré-clínicos e clínicos como tratamento alternativo para o melanoma. No entanto, a biodisponibilidade oral limitada do IBR e a necessidade de altas doses do medicamento para matar as células do melanoma são importantes desafios para viabilizar a utilização clínica do fármaco para este fim. Considerando que o melanoma está restrito à pele em estágios iniciais, a aplicação tópica de IBR pode constituir uma via de administração eficaz e com menor risco de efeitos adversos. No entanto, o desenvolvimento de formulações tópicas para o fármaco demandam estudos iniciais acerca do seu perfil de toxicidade e permeação na pele humana. Neste estudo, determinamos a toxicidade e a dermatocinética do IBR utilizando células primárias humanas e culturas organotípicas de explantes de pele humana (do inglês, human organotypic skin explant cultures, hOSEC). Depois de demonstrar que fibroblastos e queratinócitos primários humanos apresentam genes alvo de IBR, a citotoxicidade do fármaco foi determinada utilizando os ensaios de metabolização do MTT e marcação com anexina V/PI. A toxicidade do IBR na pele foi avaliada utilizando o ensaio de metabolização do TTC, e o potencial de irritação foi estabelecido utilizando avaliação histológica. Finalmente, a permeação cutânea do IBR foi avaliada ex vivo para determinar a dermatocinética do medicamento. Nossas descobertas revelam que o IBR exerce toxicidade dose-dependente em células da pele. Os queratinócitos apresentaram IC50 na mesma faixa de concentração que as células do melanoma, enquanto os fibroblastos apresentaram uma sensibilidade menor à droga. A aplicação tópica do medicamento induziu pouca irritação e toxicicdade na pele, e o medicamento demonstrou permear com sucesso o estrato córneo e atingir as camadas viáveis da pele em concentrações terapêuticas. De modo geral, nossos dados incentivam a aplicação tópica do IBR no tratamento do melanoma, abrindo caminho para futuros estudos no tema.