| Campo DC | Valor | Idioma |
|---|
| dc.contributor.advisor | Nicola, André Moraes | pt_BR |
| dc.contributor.author | Palacios, Juan Fernando Riasco | pt_BR |
| dc.date.accessioned | 2024-09-02T21:18:07Z | - |
| dc.date.available | 2024-09-02T21:18:07Z | - |
| dc.date.issued | 2024-09-02 | - |
| dc.date.submitted | 2023-07-28 | - |
| dc.identifier.citation | PALACIOS, Juan Fernando Riasco. Caracterização e classificação de epítopos de anticorpos monoclonais selecionados por Phage Display com potencial neutralizante anti-SARS-CoV-2. 2023. 104 f., il. Tese (Doutorado em Patologia Molecular) — Universidade de Brasília, Brasília, Brasília, 2023. | pt_BR |
| dc.identifier.uri | http://repositorio.unb.br/handle/10482/50274 | - |
| dc.description | Tese (doutorado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2023. | pt_BR |
| dc.description.abstract | O vírus SARS-CoV-2 é o agente etiológico responsável da COVID-19 e que produziu a pandemia
global que tomou conta do mundo em 2020. Para SARS-CoV-2, a proteína spike na superfície do
vírus é o alvo principal da maioria das vacinas atuais. A proteína spike é responsável pela
capacidade do vírus de entrar nas células humanas e, portanto, é um componente crucial do
mecanismo infeccioso do vírus. Ao provocar uma resposta imune contra epítopos específicos na
proteína spike, as vacinas visam impedir que o vírus infecte as células e se espalhe pelo corpo.
Compreender os epítopos específicos visados pelas vacinas é fundamental para desenvolver e
melhorar as vacinas e para entender por que algumas variantes do SARS-CoV-2 podem ser
menos suscetíveis às vacinas atuais.
Dentro deste contexto o desenvolvimento de anticorpos monoclonais para o COVID-19 e foi
elaborado o projeto “Caracterização e classificação de epítopos de anticorpos monoclonais
selecionados por Phage Display com potencial neutralizante anti-SARS-CoV-2” dentro do
macroprojeto “Anticorpos na terapia da COVID-19: estudo clínico de fase IIa, com plasma de
convalescentes e geração de anticorpos monoclonais humanos”, em colaboração com a
Fundação Hemocentro, o Hospital Universitário de Brasília (HUB) e o Hospital Regional da Asa
Norte (HRAN). Nele, anticorpos foram selecionados pelo método de Phage Display a partir de
RNA extraído de plasma de pacientes convalescentes. Foram produzidos e purificados anticorpos
no formato scFv, e após análise de resultados foram selecionados 6 anticorpos distintos com
sequências únicas, e caracterizados como classe 1 e clonótipos 2. Estes também são conhecidos
como clonótipos públicos IGHV3-53/3-66 com características de neutralização específicas, seligando a múltiplos locais vulneráveis do vírus na sua região RBD. Assim, os achados obtidos
viabilizaram destacar a importância das mutações somáticas na capacidade de ligação e
neutralização dos anticorpos. Este dado foi confirmado com a identificação dos epítopos destes
anticorpos, processo que permitiu conhecer o local de ligação no RBD, especificamente em sua
região RBS, e hipotetizar a possível forma de ligação dos mesmos a partir de estudos de
alinhamento de sequências das regiões determinantes de complementaridade (CDRs) com
anticorpos com alta percentagem de identidade e com estruturas descritas. A partir do conseguido
aqui, os próximos passos implicaram continuar desenvolvendo uma estratégia combinatória que
envolva a especificidade e funcionalidade dos anticorpos, e a geração de anticorpos específicos
contra o SARS-CoV-2 no formato IGG1. | pt_BR |
| dc.language.iso | por | pt_BR |
| dc.rights | Acesso Aberto | pt_BR |
| dc.title | Caracterização e classificação de epítopos de anticorpos monoclonais selecionados por Phage Display com potencial neutralizante anti-SARS-CoV-2 | pt_BR |
| dc.type | Tese | pt_BR |
| dc.subject.keyword | Anticorpos monoclonais | pt_BR |
| dc.subject.keyword | SARS-CoV-2 | pt_BR |
| dc.subject.keyword | Citometria de fluxo | pt_BR |
| dc.rights.license | A concessão da licença deste item refere-se ao termo de autorização impresso assinado pelo autor com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade de Brasília e o IBICT a disponibilizar por meio dos sites www.unb.br, www.ibict.br, www.ndltd.org sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra supracitada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, a partir desta data. | pt_BR |
| dc.description.abstract1 | The SARS-CoV-2 virus is the etiological agent responsible for COVID-19 and which produced the
global pandemic that took over the world in 2020. For SARS-CoV-2, the spike protein on the
surface of the virus is the main target of most current vaccines. The spike protein is responsible
for the virus's ability to enter human cells and is therefore a crucial component of the virus's
infectious mechanism. By eliciting an immune response against specific epitopes on the spike
protein, vaccines aim to prevent the virus from infecting cells and spreading throughout the body.
Understanding the specific epitopes targeted by vaccines is critical to developing and improving
vaccines and to understanding why some variants of SARS-CoV-2 may be less susceptible to
current vaccines.
Within this context, the development of monoclonal antibodies for COVID-19 and the project
“Characterization and classification of epitopes of monoclonal antibodies selected by Phage
Display with anti-SARS-CoV-2 neutralizing potential” was elaborated within the macroproject
“Antibodies in the therapy of COVID-19: Phase IIa clinical study, with plasma from convalescents
and generation of human monoclonal antibodies”, in collaboration with the Hemocentro
Foundation, the University Hospital of Brasília (HUB) and the Regional Hospital of Asa Norte
(HRAN). In it antibodies were selected by the Phage Display method from RNA extracted from the
plasma of convalescent patients. Antibodies were produced and purified in the scFv format, and
after analyzing the results, 06 different antibodies with unique sequences were selected, and
characterized as class 1 and clonotypes 2. These are also known as public IGHV3- 53/3-66
clonotypes with specific neutralizing characteristics, binding to multiple vulnerable sites of the virus
in its RBD region. Thus, the findings made it possible to highlight the importance of somatic
mutations in the ability to bind and neutralize antibodies. This data was confirmed with the
identification of the epitopes of these antibodies, a process that made it possible to know the
binding site in the RBD, specifically in the RBS region, and to hypothesize the possible way of
binding them based on studies of alignment of sequences with antibodies with a high percentage
of identity and with described structures. Based on what was achieved here, the next steps would
involve continuing to develop a combinatorial strategy that involves the specificity and functionality
of antibodies, and the generation of specific antibodies against SARS-CoV-2 in the IGG1 format. | pt_BR |
| dc.description.abstract2 | El virus SARS-CoV-2 es el agente etiológico responsable del COVID-19 y que produjo la pandemia
mundial que se apoderó del mundo en el año 2020. Para el SARS-CoV-2, la proteína espiga en la
superficie del virus es el objetivo principal de la mayoría de las vacunas actuales. La proteína espiga es
responsable de la capacidad del virus para ingresar a las células humanas y, por lo tanto, es un
componente crucial del mecanismo infeccioso del virus. Al provocar una respuesta inmune contra
epítopos específicos en la proteína de punta, las vacunas tienen como objetivo evitar que el virus infecte
las células y se propague por todo el cuerpo. Comprender los epítopos específicos a los que se dirigen
las vacunas es fundamental para desarrollar y mejorar las vacunas y para comprender por qué algunas
variantes del SARS-CoV-2 pueden ser menos susceptibles a las vacunas actuales.
En este contexto, dentro del macroproyecto “Anticuerpos en la terapia”, se elaboró el desarrollo de
anticuerpos monoclonales para COVID-19 y el proyecto “Caracterización y clasificación de epítopos de
anticuerpos monoclonales seleccionados por Phage Display con potencial neutralizante anti-SARSCoV-2”. de COVID-19: Estudio clínico Fase IIa, con plasma de convalecientes y generación de
anticuerpos monoclonales humanos”, en colaboración con la Fundación Hemocentro, el Hospital
Universitario de Brasilia (HUB) y el Hospital Regional de Asa Norte (HRAN). En él se seleccionaron
anticuerpos por el método Phage Display a partir de ARN extraído del plasma de pacientes
convalecientes. Los anticuerpos se produjeron y purificaron en formato scFv y, después del análisis de
los resultados, se seleccionaron 06 anticuerpos distintos con secuencias únicas y se caracterizaron
como clonotipos de clase 1 y 2. Estos también se conocen como clonotipos públicos IGHV3-53/3-66
con neutralización específica características, uniéndose a múltiples sitios vulnerables del virus en su
región RBD. Así, los hallazgos permitieron resaltar la importancia de las mutaciones somáticas en la
capacidad de unión y neutralización de anticuerpos. Este dato se confirmó con la identificación de los
epítopos de estos anticuerpos, proceso que permitió conocer el sitio de unión en el RBD,
específicamente en su región RBS, e hipotetizar la posible forma de unión a partir de estudios de
alineamiento de secuencias de las regiones que determinan la complementariedad (CDRs) con
anticuerpos con un alto porcentaje de identidad y con estructuras descritas. Con base en lo que se logró
aquí, los próximos pasos implicaría continuar desarrollando una estrategia combinatoria que involucren
la especificidad y funcionalidad de los anticuerpos, y la generación de anticuerpos específicos contra el
SARS-CoV-2 en el formato IGG1. | pt_BR |
| dc.description.unidade | Faculdade de Medicina (FMD) | pt_BR |
| dc.description.ppg | Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular | pt_BR |
| Aparece nas coleções: | Teses, dissertações e produtos pós-doutorado
|
