Efeito da incubação do tecido ovariano de gata doméstica em eritropoietina após criopreservação e xenotransplante

Abstract

Grande parte das espécies felinas encontram-se ameaçadas de extinção. Assim, a criação de bancos de germoplasma se faz necessária e aponta para a importância de técnicas eficazes de criopreservação e xenotransplante de tecido ovariano, para posterior produção de embriões in vitro. No entanto, a criopreservação e o período de isquemia/reperfusão após o transplante ainda são um desafio, pois desencadeiam uma massiva perda folicular. Assim, a eritropoietina (EPO), pode ser considerada uma possível alternativa para amenizar essas injúrias e preservar os folículos devido aos seus efeitos angiogênicos, anti-apoptóticos e antioxidantes. O presente estudo avaliou a eficácia da incubação de tecidos ovarianos de gatas domésticas em eritropoietina antes e depois da criopreservação. Para isso, os ovários recebidos de uma clínica veterinária foram seccionados e divididos aleatoriamente entre os grupos denominados EPO+CRIO (incubados em EPO e criopreservados em seguida) e CRIO+EPO (criopreservados, descongelados e incubados em EPO), nos quais a incubação foi realizada em MEM e 100 UI de EPO por duas horas à 37°C (antes ou depois da criopreservação), e no grupo denominado CRIO, em que os fragmentos foram somente criopreservados igualmente por congelamento lento. Os fragmentos descongelados dos três grupos foram xenotransplantados para a região subcutânea dorsal de camundongas nude Swiss (nu/nu) e recuperados aos 7, 14, 21 e 28 dias pós-transplante. Foram realizadas análises histológicas e histoquímicas para a contagem e classificação de folículos e mensuração de áreas de fibrose, e testes imunohistoquímicos para averiguar a presença de vasos sanguíneos e avaliar os folículos proliferativos. A EPO se mostrou eficaz na sobrevivência folicular quando utilizada após a criopreservação, e apresentou o aumento de vasos sanguíneos no grupo EPO+CRIO aos 21 dias pós-transplante. Assim, é possível inferir que a EPO mostrou efeitos benéficos, mas estudos futuros são necessários para maior comprovação da eficácia dos protocolos apresentados.