Desenvolvimento e caracterização de carreadores lipídicos nanoestruturados para o tratamento tópico da hidradenite supurativa

Abstract

A hidradenite supurativa é uma condição inflamatória crônica e debilitante relacionada à obstrução permanente das unidades pilossebáceas da pele, que apresenta poucas opções terapêuticas. O fosfato de clindamicina e a rifampicina são os principais fármacos atualmente utilizados no tratamento dessa doença e são usados em associação devido aos seus mecanismos complementares de ação. No entanto, o uso oral desses antibióticos está associado a efeitos adversos graves. O presente estudo propõe de maneira inédita o uso tópico dessa associação de fármacos encapsulada em carreadores lipídicos nanoestruturados (CLN) e avalia a eficácia do sistema em termos de direcionamento da penetração cutânea desses fármacos para os folículos pilosos, levando-se em consideração a condição sebácea em que a pele afetada pela hidradenite supurativa se encontra. Primeiramente, desenvolveu-se um método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência para determinação simultânea dos fármacos na presença dos contaminantes da pele. O método desenvolvido apresentou elevada capacidade de recuperação (> 85%) do fosfato de clindamicina e rifampicina das camadas cutâneas e provou ser adequado considerando todos os parâmetros de validação avaliados. A compatibilidade química entre os fármacos foi demonstrada usando análise térmica combinada com ensaios de infravermelho e raio-X. Por conseguinte, os resultados indicaram compatibilidade entre os fármacos, sugerindo que essas substâncias podem ser usadas em conjunto em uma mesma formulação. Os CLN contendo fosfato de clindamicina e rifampicina foram obtidos e caracterizados quanto ao seu diâmetro hidrodinâmico, índice de polidispersividade, potencial zeta, eficiência de encapsulação, carga dos fármacos, morfologia e pH. Os CLN desenvolvidos apresentaram diâmetro de, aproximadamente, 400 nm e índice de polidispersividade de 0,2 com potencial zeta negativo (– 45 mV). A formulação demonstrou estabilidade relativa por 60 dias sob refrigeração. Não ocorreram alterações morfológicas entre os CLN contendo ou não os fármacos. A eficiência de encapsulação do fosfato de clindamicina foi em torno de 80% e da rifampicina foi de 95%, e o pH da dispersão dos CLN foi 6,5. A liberação dos fármacos foi determinada in vitro durante um período de 12 h, utilizando uma membrana de acetato de celulose acoplada a uma célula de difusão do tipo Franz modificada. Os CLN reduziram significativamente (p ≤ 0,001), a taxa de liberação dos fármacos em comparação ao controle com os fármacos livres. A adição de fármacos no CLN não alterou a fluidez dos nanotransportadores e os dados de espectroscopia de ressonância paramagnética eletrônica com marcador de spin também mostraram que os CLN interagem com os domínios lipídicos do estrato córneo, sugere-se que os fármacos causam instabilidade nos CLN ou aumentam suas afinidades pelos lipídios do estrato córneo. Os ensaios de permeação e penetração foram realizados in vitro em pele de orelha de suínos. Em geral, os nanocarreadores lipídicos parecem se acumular nas aberturas dos folículos pilosos, aumentando significativamente em 12 vezes a captação de rifampicina nessas estruturas e criando um depósito de fosfato de clindamicina ainda maior nos folículos pilosos (38,1 ± 8,5 μg/cm2), mesmo quando a pele está em uma condição sebácea que mimetiza o que ocorre durante a fisiopatologia da doença. Por fim, os testes de irritação HET-CAM e em epiderme humana reconstruída provaram que a nanoformulação é segura para aplicação tópica. Assim, os CLN que incorporam os antibióticos fosfato de clindamicina e rifampicina parecem ser uma estratégia viável para o tratamento tópico de hidradenite supurativa.