Análise do papel da SCRP-CFEM 779733 e da serina peptidase 747596 na interação de Trichoderma harzianum com seus hospedeiros

Abstract

Trichoderma harzianum é um fungo utilizado no controle de doenças vegetais e como biofertilizante devido à sua capacidade de antagonizar fitopatógenos, promover crescimento vegetal e induzir resposta de defesa em plantas hospedeiras. Este fungo libera moléculas que alteram a estrutura e o metabolismo do hospedeiro permitindo a colonização de suas raízes, tais como as proteínas com domínio CFEM e as serina peptidases, estas proteínas já foram identificadas nos secretomas e transcritomas de espécies de Trichoderma durante a interação com fungos fitopatogênicos ou com plantas hospedeiras. Recentemente, alguns autores vêm estudando a função destas proteínas em outras interações, como, por exemplo, a micoparasítica. Embora estas proteínas estejam envolvidas nestas interações, seus papéis ainda não foram elucidados. Para validar a função dos genes SCRP-CFEM 779733 e serina peptidase 747596, que têm expressão aumentada na interação de T. harzianum com o feijoeiro Phaseolus vulgaris ou com o fungo fitopatogênico Sclerotinia sclerotiorum, foram construídos dois mutantes para cada gene através de deleção por recombinação homóloga. Os mutantes foram comparados com o isolado parental quanto à capacidade de antagonizar S. sclerotiorum, de promover crescimento no feijoeiro e de induzir resistência sistêmica contra S. sclerotiorum. Não foi obtido mutante para o gene da serina peptidase em nenhum dos eventos de transformação. Foram obtidos dois mutantes nocauteados para o gene SCRP-CFEM, denominados Δthcfem 1º e Δthcfem 2º. Estes mutantes não apresentaram diferença quanto à capacidade antagônica em comparação ao isolado parental. Também não foram observadas mudanças em relação à área foliar e volume de raizes de feijoeiro cultivados na presença dos mutantes em comparação com o isolado parental. No entanto, foi observada diferença no tamanho total e diâmetro médio das raízes. O perfil de expressão de genes de defesa foi semelhante para feijoeiros cultivados na presença dos mutantes e isolado parental. Nossos experimentos iniciais sugerem que a SCRP-CFEM 779733 não atua diretamente no micoparasitismo, mas provavelmente tem papel na modelagem da arquitetura de raízes de feijoeiro através do desenvolvimento de raízes laterais mais finas.