Análises transcricionais no estudo da expressão genética de Paracoccidioides brasiliensis em condições que mimetizam nichos do hospedeiro

Abstract

O fungo Paracoccidioides brasiliensis é um patógeno humano com ampla distribuição na América Latina. Este microrganismo causa a paracoccidioidomicose, a micose sistêmica mais prevalente na América Latina. O fungo causa infecção quando o hospedeiro inala propágulos da fase miceliana do organismo. Estas partículas atingem o pulmão e podem disseminar para outros órgãos e tecidos. Embora o perfil de expressão gênica em P. brasiliensis tem sido estudado, pouco se conhece sobre o padrão de expressão de genes desta espécie durante o processo infeccioso. O presente trabalho descreve a análise dos genes diferencialmente expressos em células leveduriformes de P. brasiliensis recuperado de animais infectados e durante incubação com sangue humano, que mimetiza a rota hematogênica de disseminação do fungo. Adicionalmente, também foram identificados os genes preferencialmente expressos durante incubação do fungo com plasma humano, mimetizando os sítios de infecção com inflamação. Os dados revelaram que genes relacionados com captação de ferro, síntese de melanina e defesa celular foram superexpressos no modelo de infecção animal. Os transcritos induzidos durante a incubação de células leveduriformes com sangue humano foram aqueles predominantemente relacionados com síntese/remodelamento da parede celular. Genes relacionados com degradação de ácidos graxos, síntese protéica, estresse osmótico, remodelamento da parede celular e defesa celular foram superexpressos no tratamento com plasma humano. A expressão diferencial dos genes identificados foi confirmada por ensaios de dot blot, northern blot e RT-PCRsq. Os dados gerados podem facilitar estudos funcionais de novos genes induzidos os quais podem ser importantes para estratégias de sobrevivência e crescimento do P. brasiliensis em diferentes nichos do hospedeiro.